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Una nueva opción de control del colesterol específica del sitio y una mejor manera de evaluar el estado de la vitamina D en cuidados intensivos. Lea acerca de los artículos sobre estos temas publicados recientemente en elRevista de investigación de lípidos.

El colesterol es un componente esencial de las membranas celulares de los mamíferos. Su forma libre o no esterificada, localizada en el plasma, controla las propiedades mecánicas de la bicapa lipídica, como la rigidez y la permeabilidad. El colesterol también interactúa directamente con una amplia variedad de proteínas celulares en la membrana plasmática, regulando así la señalización celular.

Los investigadores manipulan los niveles de colesterol celular mediante extracción química y enriquecimiento del colesterol con metil-beta-ciclodextrina o aductos de MβCD y MβCD-colesterol, respectivamente; o por inhibición de la biosíntesis de nuevo colesterol celular por parte de las estatinas. Estos métodos son convenientes pero carecen de control específico de los niveles de colesterol dentro de las células. Además, pueden provocar una reducción inespecífica del colesterol que ejerce efectos nocivos sobre las células, incluida la muerte celular y la alteración inespecífica de la fisiología celular.

Ha Pham y un equipo de investigadores de la Universidad de Illinois en Chicago y la Universidad de Australia Occidental, Perth, han desarrollado un nuevo sistema que permite la reducción del colesterol inducible y específica del sitio. Crearon una colesterol oxidasa bacteriana codificada genéticamente cuya actividad de unión a la membrana se altera de una manera que permite un control espaciotemporal específico de su objetivo en la membrana mediante la dimerización inducida químicamente con una proteína asociada ubicada en un sitio específico de la membrana. El equipo documentó el sistema y sus hallazgos en un artículo de investigación reciente publicado en la revistaRevista de investigación de lípidos.

En combinación con imágenes cuantitativas del colesterol y ensayos de actividad de señalización, este novedoso sistema permitirá la determinación inequívoca de funciones específicas del sitio del colesterol en diversas membranas celulares, incluidas la membrana plasmática y la membrana lisosomal.

La vitamina D ayuda a regular los niveles de calcio y fósforo, desempeña un papel en el mantenimiento de la estructura ósea adecuada y regula la función inmune. La deficiencia de vitamina D provoca enfermedades óseas, como el raquitismo, así como cáncer y enfermedades cardiovasculares, y se asocia con un mayor riesgo de infecciones respiratorias, incluido el COVID-19.

Cuando el cuerpo la absorbe, la vitamina D se metaboliza a 25-hidroxivitamina D, o 25OH-D, que a menudo se usa como biomarcador para medir los niveles de vitamina D en el cuerpo. La cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem, o LC-MS/MS, es el estándar de oro para la determinación cuantitativa de 25OH-D, y esta técnica tiene varias ventajas sobre los inmunoensayos utilizados anteriormente, incluida una mayor selectividad, límites de detección más bajos y una precisión mejorada.

Investigadores de la Universidad McMaster y el Instituto de Investigación del Hospital Infantil del Este de Ontario han desarrollado un método de alto rendimiento para evaluar el estado de la vitamina D a partir de muestras de sangre basándose en infusión directa (MS/MS o DI-MS/MS), luego de una derivatización mediante clic usando 2- nitrosopiridina, que está optimizada para un análisis más rápido que LC-MS/MS y una mayor precisión que un inmunoensayo comercial.

En un estudio de prueba comparativo, Erick Helmeczi y su equipo descubrieron que las concentraciones de 25OH-D de muestras de sangre de referencia medidas por DI-MS/MS estaban menos sesgadas que el inmunoensayo comercial en comparación con LC-MS/MS. Descubrieron que, en comparación con DI-MS/MS, el inmunoensayo comercial, utilizado a menudo para la detección en ensayos clínicos, subestima la prevalencia de la deficiencia de vitamina D en niños críticamente enfermos que podrían beneficiarse de suplementos de vitamina D en dosis altas.

Estos hallazgos, publicados en un artículo en elJournal of Lipid Research, muestran que DI-MS/MS puede ser Se utiliza para evaluar el estado de la vitamina D de forma rápida y fiable en ensayos clínicos y estudios a gran escala. Los investigadores centrarán sus esfuerzos futuros en adaptar este método con el fin de informar valores clínicos.

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Nivedita Uday Hegdekar es una doctora reciente. Licenciado en Bioquímica y Biología Molecular por la Universidad de Maryland, Baltimore.

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